Tạo dòng gen là gì
Nền tảng công nghệ của Nanogen là ứng dụng các tiến bộ trong công nghệ di truyền kết hợp với công nghệ lên men để tạo ra các sản phẩm protein tái tổ hợp. Protein tái tổ hợp là những protein có bản chất tự nhiên nhưng được sản xuất theo con đường “không truyền thống” nhờ những tế bào tái tổ hợp. 4 hướng nghiên cứu chính của Nanogen là: kháng thể đơn dòng tái tổ hợp, cytokines, hormones và thuốc hóa trị. Giai đoạn nghiên cứuVề nguyên tắc, kỹ thuật protein tái tổ hợp hay tạo dòng (cloning) gồm các bước sau (1) tách chiết và tinh sạch DNA bộ gene của sinh vật cần tạo dòng, (2) tạo ra đoạn gene mã hóa cho protein mong muốn in-vitro bằng phản ứng chuỗi (PCR), (3) tạo vector chuyển gene, (4) chuyển gene mong muốn vào tế bào nhận, (5) phát hiện và phân lập các dòng tế bào nhận có khả năng sản xuất nhiều protein tái tổ hợp nhất. Trong tế bào chủ, đoạn gene tái tổ hợp sẽ biểu hiện thành protein mong muốn (protein tái tổ hợp). Điều kiện tiên quyết để quyết định nên thành công của quá trình sản xuất thuốc theo con đường tái tổ hợp là thiết kế hệ thống biểu hiện. Thông thường các công ty lớn trên thế giới chuyên về thiết kế khung biểu hiện có sẵn, nhóm nghiên cứu phát triển của các công ty dược sẽ tìm kiếm các dữ liệu liên quan đến sản phẩm cần sản xuất và sẽ tìm cách tối ưu hóa để cho hiệu quả sản xuất cao nhất. Tương tự, Nanogen cũng phát triển những khung biểu hiện riêng biệt dành cho những sản phẩm đặc trị của công ty. Giai đoạn sản xuấtĐể lên men tế bào có thể dùng phương pháp nuôi cấy bề mặt, nuôi cấy chìm, nuôi cấy lắc, nuôi cấy huyền phù, nuôi cấy phân đợt, nuôi cấy liên tục, nuôi cấy phân đoạn-liên tục, nuôi cấy fedbatch…. Sau lên men, tùy vào từng loại protein mà có phương pháp xử lý khác nhau. Tất cả các sản phẩm CNSH dược của Nanogen đều tuân thủ nghiêm ngặt các quy định về thực hành tốt sản xuất WHO-GMP. Chính vì thế, các protein tái tổ hợp dùng trong sản xuất thuốc luôn phải tinh sạch hoàn toàn. Công cụ hỗ trợ cho quá trình tinh sạch chính là hệ thống sắc ký lỏng. Tùy từng loại protein khác nhau mà phương pháp tinh chế sẽ được thiết kế cho phù hợp. Để kiểm tra độ tinh sạch, độ an toàn cũng như hoạt tính của các protein này, nhân viên phòng kiểm nghiệm sẽ là người chịu trách nhiệm chính. Protein tái tổ hợp sau khi kiểm nghiệm và bảo đảm độ an toàn và đạt được các tiêu chuẩn của WHO và Cục quản lý Dược sẽ được đem đi pha chế với các thành phần tá dược khác để đóng ống và đóng gói. Sản phẩm cuối cùng sẽ được tái kiểm tra độ chắc chắn về độ an toàn cũng như hoạt tính trước khi đem ra thị trường. Thử nghiệm tiền lâm sàngCác thử nghiệm tiền lâm sàng của Nanogen bao gồm nhiều thử nghiệm về dược động học, độc tính cấp và mãn tính, độc tố di truyền, độc tính đến quá trình sinh trường - sinh sản và tính sinh miễn dịch. Tách dòng gene from Hạnh Hiền Nếu bạn là sinh viên của ngành công nghệ sinh học, chắc hẳn bạn đã từng học hoặc ít nhất là từng nghe qua cụm từ “kỹ thuật tạo dòng gen”. Trên thực tế, theo tôi được biết, một số trường Đại học ở thành phố Hồ Chí Minh đã đưa kỹ thuật này vào chương trình thực hành chuyên ngành cho sinh viên năm 3-4. Vậy kỹ thuật tạo dòng gen là gì? Nói một cách siêu ngắn gọn thì kỹ thuật tạo dòng gen giúp chúng ta lưu trữ các đoạn gen mà chúng ta quan tâm vào các tế bào như vi khuẩn, nấm men, tế bào động vật, v.v… Bạn có thể tham khảo một số ứng dụng của kỹ thuật tạo dòng gen sau đây.
Sau đây, xin mời các bạn cùng tìm hiểu về nguyên lý của kỹ thuật tạo dòng gen bằng chương trình flash minh họa bên dưới. Lưu ý: Để xem được chương trình, bạn vui lòng cài đặt Adobe Flash Player tại đây. Trước khi nhấp vào nút “Install now”, bạn nhớ bỏ chọn 2 Option Offers ở giữa trang để tránh cài thêm McAfee Security Scan Plus và McAfee Safe Connect. Để xem được Flash trên thiết bị di động, bạn có thể cài đặt trình duyệt FlashFox
[swf src=”http://www.sinhhocphantu.net/wp-content/uploads/2018/08/1901_plasmid_cloning.swf” height=”600″ width=”800″][/swf] |